Na sessão de treinos de abertura em Jerez, o piloto da Gresini Ducati, Alex Marquez, assumiu a liderança, superando seu irmão Marc, que havia liderado a maior parte da sessão. Durante a maioria dos 45 minutos, foi um 1-2 dos Marquez. No entanto, Alex Marquez tomou a decisão estratégica de trocar os pneus no final da sessão, permitindo que ele ultrapassasse seu irmão e terminasse com o tempo mais rápido de 1m36.630s. Ele ficou meio segundo à frente de Marc Marquez e seu companheiro de equipe. Maverick Vinales, que havia dominado no Circuito das Américas, garantiu a terceira posição após equipar um novo conjunto de pneus. Aleix Espargaro melhorou sua posição na última volta, terminando em quarto lugar. Franco Morbidelli, em uma Ducati de 2024, ficou em quinto, enquanto outros pilotos na mesma moto, Jorge Martin, Pecco Bagnaia e Enea Bastianini, terminaram em nono, 12º e 13º lugar, respectivamente. O piloto wildcard da KTM, Dani Pedrosa, foi o mais rápido entre os pilotos RC16, em sexto lugar, seguido de perto por Brad Binder. Os outros pilotos wildcard, Lorenzo Savadori e Stefan Bradl, terminaram em 23º e 24º lugar, empurrando Luca Marini para a última posição. Savadori está pilotando uma moto experimental com novos recursos que a Aprilia planeja usar mais tarde na temporada. A RC213V de Bradl, por outro lado, passou por mudanças significativas em termos de aerodinâmica e unidade de assento em comparação com as motos regulares. Dois pilotos, Johann Zarco e Augusto Fernandez, sofreram acidentes durante a sessão, mas Zarco se recuperou rapidamente e voltou a ficar de pé.
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